LAUSR

Objectives Endothelial dysfunction is involved in various aspects of vascular biology and different stages of cardiovascular diseases (CVDs). Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein (NOD) 2, a pivotal innate immune receptor for muramyl dipeptide (MDP), has been reported to be a central regulator in CVDs. Previously, we reported that NOD2 played a leading role in MDP-triggered oxidative stress in endothelial cells (ECs). However, whether NOD2 participates in the regulatory mechanism of vascular cell adhesion molecule‑1 (VCAM-1) and endothelin‑1 (ET-1) expression was not elucidated. Methods Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were stimulated with MDP for 12 h. mRNA expression of VCAM‑1 and ET‑1 was detected using real time polymerase chain reaction (PCR). Scrambled control small interfering RNA (siRNA) and NOD2 siRNA were transfected into HUVECs using Lipofectamine 2000 reagent (Invitrogen, Waltham, MA, USA). Furthermore, pyrrolidine dithiocarbamate was adopted to investigate the effect of nuclear factor κB (NF-κB) on NOD2-mediated VCAM‑1 and ET‑1 gene expression in MDP-treated HUVECs. Results Data showed that MDP significantly increased VCAM‑1 and ET‑1 mRNA expression, which was dependent on NOD2. In addition, NF-κB inhibition suppressed NOD2-mediated gene expression of VCAM‑1 and ET‑1. Conclusion Collectively, we confirmed NOD2 aggravated VCAM‑1 and ET‑1 gene expression through NF-κB in HUVECs treated with MDP. Zielsetzungen Eine endotheliale Dysfunktion ist an vielfältigen Aspekten der Gefäßbiologie und an unterschiedlichen Stadien von Herz-Kreislauf-Erkrankungen (CVDs) beteiligt. NOD2 („nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein“), ein entscheidender angeborener Immunrezeptor für Muramyldipeptid (MDP), wurde als zentraler Regulator bei Herz-Kreislauf-Erkrankungen beschrieben. In früheren Veröffentlichungen haben wir dargelegt, dass NOD2 eine wesentliche Funktion beim MDP-getriggerten oxidativen Stress in Endothelzellen (ECs) hat. Ob NOD2 jedoch am Regulationsmechanismus der Expression von VCAM‑1 („vascular cell adhesion molecule-1“) und ET‑1 („endothelin-1“) beteiligt ist, ließ sich nicht eindeutig klären. Methoden Humane Nabelvenenendothelzellen (HUVECs) wurden 12 h lang mit MDP stimuliert. Wir konnten die mRNA-Expression von VCAM‑1 und ET‑1 mittels Real-time-PCR (Polymerasekettenreaktion) nachweisen. „Scrambled control“ siRNA („small interfering RNA“) und NOD2-siRNA wurden mit Lipofectamine 2000-Reagenz (Invitrogen, Waltham/MA, USA) in HUVECs transfiziert. Ferner wurde Pyrrolidindithiocarbamat eingesetzt, um die Wirkung des nukleären Faktors κB (NF-κB) auf die NOD2-vermittelte VCAM-1- und ET-1-Genexpression in MDP-vorbehandelten HUVECs zu untersuchen. Ergebnisse Die Befunde zeigten, dass MDP die von NOD2 abhängige VCAM-1- und ET-1-mRNA-Expression signifikant erhöhte. Darüber hinaus supprimerte die NF-κB-Inhibition die NOD2-vermittelte Genexpression von VCAM‑1 und ET‑1. Schlussfolgerung Insgesamt bestätigten wir die durch NOD2 beeinträchtigte VCAM-1- und ET-1-Genexpression mittels NF-κB in mit MDP vorbehandelten HUVECs.