LAUSR

BackgroundSo far STR (Short Tandem Repeat) profiling of single cells has played hardly any role in forensic molecular-biological casework; however, the application of this technique could open up new possibilities for deducing the unambiguous DNA profile of each single contributor involved in a mixture of two or more components.ObjectiveFor this purpose DEPArrayTM technology was used to isolate single white blood cells from mixed stains containing blood from two or three different contributors. The STR profiling was carried out on each single cell.Material and methodsIn order to standardize the interpretation of the findings, which, like all low template (LT) DNA analyses, shows characteristic artifacts, leukocytes from a fresh blood sample were examined in advance and the profiles were evaluated. Based on these findings, the results of the examination of three mixed stains (consisting of blood from two or three persons) were evaluated.ResultsIn this way, complete or almost complete DNA profiles could be deduced for all persons involved in the corresponding mixture.ConclusionThe STR profiling of single cells isolated by DEPArrayTM technology opens up completely new possibilities in the field of mixture deconvolution, especially for mixtures composed of cells of the same cell type.ZusammenfassungHintergrundSTR(Short Tandem Repeat)-Analysen von Einzelzellen spielen bislang in der forensisch-molekularbiologischen Fallarbeit kaum eine Rolle. Die Anwendung dieser Technik, im Speziellen zur Ableitung von DNA-Profilen einzelner, an einer Mischung beteiligten Personen, könnte jedoch neue Möglichkeiten eröffnen.Ziel der ArbeitZu diesem Zweck sollen in dieser Arbeit mit Hilfe der DEPArrayTM-Technologie einzelne Leukozyten aus Mischspuren, in denen sich Blut mehrerer Personen findet, separiert einer Einzelzell-STR-Analyse zugeführt werden.Material und MethodeUm die Interpretation der Befunde zu standardisieren, die wie alle Low-template (LT)-DNA-Analysen charakteristische Artefakte aufweisen, wurden vorab Leukozyten einer frischen Blutprobe untersucht und die Profile ausgewertet. Basierend auf diesen Erkenntnissen wurden im zweiten Schritt die Ergebnisse der Untersuchung von 3 Mischspuren (bestehend aus Blut von 2 bzw. 3 Personen) bewertet.ErgebnisseFür alle, an den jeweiligen Spuren beteiligte Personen konnten vollständige bzw. fast vollständige DNA-Profile abgeleitet werden.SchlussfolgerungDurch die STR-Typisierung einzelner, mit Hilfe der DEPArrayTM-Technologie, separierter Zellen eröffnen sich vollständig neue Möglichkeiten zur Ableitung von Einzelprofilen aus Mischungen, insbesondere wenn sich die entsprechenden Mischspuren aus Zellen des gleichen Zelltyps zusammensetzen.