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This paper estimates population-based prevalence of HIV, syphilis, HSV-2 and factors influencing HIV infection using a national sample of 1914 female sex workers (FSWs) in 7 regions in Tanzania. Additionally, HIV incidence was estimated by comparing biological HIV results with self-reported HIV status. The average HIV prevalence among FSWs in all 7 regions was 28%, ranging from 14% in Tabora to 38% in Shinyanga. HIV incidence was found to be 13 per 100 person-years. Syphilis prevalence was 8% with significantly higher burden found in Iringa (11%), Mbeya (13%), and Shinyanga (12%). Nearly 60% of the study population was infected with HSV-2. The high HIV prevalence and incidence coupled with suboptimal condom use indicate an urgent need to roll out the “Treat-All” approach and provide antiretroviral therapy to FSWs living with HIV regardless of their CD4 count. In addition, antiretroviral-based prevention technologies such as oral pre-exposure prophylaxis and microbicides should be piloted and evaluated.ResumenEste documento estima la prevalencia de VIH, la sífilis, el VHS-2 y los factores que contribuyen a la infección por el VIH, utilizando una muestra nacional de 1.914 trabajadoras sexuales femeninas (TSF) en 7 regiones de Tanzania. Además, se estimó la incidencia del VIH comparando el resultado biológico del VIH con el resultado de la autoevaluación individual. La prevalencia promedio de VIH entre las TSF en las 7 regiones fue del 28%, desde el 14% en Tabora hasta el 37.5% en Shinyanga. La incidencia del VIH fue de 13 en 100 persona-años. La prevalencia de sífilis fue del 8% con una incidencia significativamente mayor en Iringa (11%), Mbeya (13%) y Shinyanga (12%). Casi el 60% de la población estudiada estaba infectado con VHS-2. La alta prevalencia e incidencia del VIH junto con niveles subóptimos de uso del condón indican una necesidad urgente de implementar el enfoque “Treat-All” en donde inmediatamente después de un diagnóstico de VIH positivo los pacientes inician la terapia antirretroviral, y proporcionar terapia antirretroviral a las TSF que viven con VIH, independientemente de su recuento de CD4. Es también importante que los métodos de prevención basados en el uso de antirretrovirales, como la profilaxis oral previa a la exposición (PrEP) y los microbicidas, sean sometidos a prueba y evaluación.