LAUSR

Introduction/objectifs Le dialogue bi-directionnel etabli entre les cellules tumorales et leur microenvironnement joue un role dans le developpement tumoral et le processus metastatique. Ce microenvironnement est un sanctuaire pour les cellules resistantes aux drogues et participe egalement a enrichir l’heterogeneite des tissus tumoraux. Une meilleure connaissance de l’heterogeneite tumorale et des communications cellulaires est un des points cles des therapies ciblees. Ce travail porte sur l’utilisation des nouvelles approches microfluidiques qui permettent de caracteriser l’heterogeneite tumorale a l’echelle de cellules uniques. Materiels/Patients et methodes Les jonctions communicantes entre des cellules d’osteosarcome (lignee humaine MNNG-HOS) et des cellules microenvironnement (cellules souches mesenchymateuses, endotheliales) ont ete etudiees en tant reel par le suivi du transfert d’un traceur fluorescent entre deux cellules (donneuse et receveuse). Des cellules tumorales ont ete isolees par une technique dielectophoretique (DEPArray™) a partir de sections tissulaires de 30 micrometres d’epaisseur, dissociees puis marquees a l’aide d’anticorps. Une approche similaire a ete utilisee pour isoler des cellules tumorales du sang circulant. Resultats La technique DEPArray™ permet l’etude des jonctions communicantes en temps reel entre deux cellules. Les cellules d’osteosarcome communiquent entre elles, avec les cellules endotheliales, avec les cellules mesenchymateuses lorsque celles-ci sont en cours de differenciation osteoblastique mais aucune communication n’a pu etre mise en evidence avec les macrophages, osteoblastes et osteocytes. A partir des sections de tissus, les cellules tumorales ont ete isolees par l’utilisation de marqueurs differentiels qui associent pan-cytokeratine, vimentine et contenu en ADN. Pour les cellules tumorales circulantes, une etape de pre-enrichissement microfluidique (Parsortix™) est necessaire avant l’isolement par DEPArray™. Conclusions Les approches microfluidiques permettent l’isolement de cellules rares pour des etudes moleculaires plus approfondies. Ces nouvelles techniques permettent de mieux caracteriser l’heterogeneite tumorale a l’echelle de cellules uniques et viennent completer l’arsenal disponible en anatomie pathologie.