LAUSR

La physiopathologie des infections determinees par les especes du complexe Scedosporium apiospermum est encore mal connue. La capacite de ces champignons a acceder aux ressources en fer constitue cependant un facteur important de leur virulence, le fer etant implique dans de nombreux processus biologiques essentiels. Neanmoins, malgre son abondance dans l’environnement, il ne peut etre assimile directement par les microorganismes, qui ont donc developpe diverses strategies pour son acquisition. Le mecanisme le plus repandu consiste dans la secretion de chelateurs du fer appeles siderophores. Ces metabolites secondaires sequestrent le fer extracellulaire et permettent son assimilation par le microorganisme via des transporteurs membranaires specifiques (TMS). Chez les Ascomycetes, les siderophores sont produits par synthese peptidique non-ribosomale, qui s’effectue via des proteines appelees non-ribosomal peptide synthetases (NRPS). Il a ete montre dans notre unite que, dans des conditions de carence en fer, S. apiospermum est capable de produire un siderophore, le N α -methylcoprogene B. Cependant, les genes assurant la synthese de cet hydroxamate restent inconnus, et l’implication d’autres siderophores dans le metabolisme du fer n’a jamais ete investiguee, notamment lorsque le champignon se developpe dans un environnement riche en fer lie a des proteines comme c’est le cas chez l’hote. L’analyse bioinformatique du genome de S. apiospermum nous a permis d’identifier 7 orthologues des genes SID impliques dans la synthese de la fusarinine C et de la ferricrocine chez Aspergillus fumigatus , ainsi que 9 genes codant des proteines de type MFS potentiellement impliquees dans l’assimilation des complexes ferrisiderophores, et 13 codant des permeases a Fe++ ou Fe+++ ou des enzymes potentiellement impliquees dans des systemes d’oxydo-reduction du fer. De maniere interessante, il s’avere que les genes potentiellement impliques dans la synthese du N α -methylcoprogene B sont regroupes en cluster comme il est frequemment observe pour les siderophores des Ascomycetes. Les genes regulant le transport transmembranaire du fer sont, quant a eux, repartis de facon heterogene dans le genome. Pour confirmer le role de ces genes, nous avons etudie leur niveau d’expression par RT-qPCR apres 5 jours de culture en milieu carence en fer ou au contraire en presence d’un exces de fer libre (Fe++ ou Fe+++) ou lie a la transferrine. Contrairement a nos attentes, l’expression des orthologues des genes SID n’est pas affectee lors d’une carence martiale. Il est cependant possible que ces genes soient induits seulement lors de la phase lineaire de croissance et ces experiences seront reproduites avec des temps d’incubation plus courts. Neanmoins, nous pouvons deja affirmer que les genes contr6lant la biosynthese des siderophores et des TMS sont reprimes en presence d’un exces de fer lie a la transferrine, et que leur expression reste inchangee en presence d’un exces de fer libre. La comprehension des mecanismes regulant le metabolisme du fer via les NRPS permettra de mieux apprehender la physiopathologie des infections a S. apiospermum et pourra servir de base a la definition de nouvelles strategies antifongiques. En effet, les NRPS qui sont absentes chez l’homme, pourraient constituer des cibles therapeutiques pour lutter contre les infections a S. apiospermum.