LAUSR

Introduction Les nanoparticules lipidiques vectorisees avec le peptide NFL-TBS ciblent specifiquement les oligodendrocytes (OL) ; elles pourraient permettre de promouvoir la remyelinisation mais leur mecanisme d’action n’est pas connu. Objectifs Determiner les mecanismes de penetration des nanoparticules lipidiques (LNC) vectorisees avec le peptide NFL-TBS.40-63, dont nous avions demontre l’effet de differenciation selectif sur les OL (Fressinaud et Eyer, 2015). Patients et Methodes Les cultures d’OL etaient traitees par differents inhibiteurs de l’endocytose, puis par LNC (100 nm) marquees par un fluorochrome (DiD) et adsorbees sur NFL-TBS. L’incorporation du DiD par les OL identifies par CNP etait quantifiee par microscopie confocale. La colocalisation du DiD et de NFL (biotinyle, revele par la streptavidine) et du DiD avec Rab5, un marqueur des endosomes precoces, etaient aussi etudiees. Enfin les LNC etaient caracterisees par microscopie electronique a transmission (MET). Resultats La MET permettait d’observer des particules claires, alignees le long de filaments de peptide. En microscopie confocale les vues orthogonales mettaient en evidence la localisation intracytoplasmique du DiD dans les OL differencies (CNP + ). On notait egalement dans les OL la colocalisation du DiD avec NFL-TBS, ainsi qu’avec Rab5 (triples marquages). Differents inhibiteurs montraient l’implication de plusieurs mecanismes d’endocytose : vesicules a clathrine, a caveoline, et macropinocytose. Discussion Differentes approches (immunocytochimie, inhibiteurs) indiquent donc que les LNC vectorisees avec NFL-TBS sont captees par les OL in vitro en empruntant les principales voies d’endocytose. Ces proprietes pourraient etre mises a profit pour favoriser la delivrance selective d’agents remyelinisants (e.g. facteurs de croissance). Conclusion Les LNC ainsi vectorisees pourraient permettre d’apporter des molecules pro-remyelinisantes aux OL : de maniere specifique ce potentiel therapeutique eventuel est explore in vitro.