LAUSR

Des productions de Cellules Stromales Mesenchymateuses (CSM) sont realisees, sur Atlantic BIO GMP, a partir de moelle osseuse (MO). La presence en tres faible quantite des cellules d’interet ainsi que l’absence de marqueurs specifiques rendent impossible leur quantification dans la MO. La quantite de cellules ensemencees est, a ce jour, definie a partir de la numeration des leucocytes realisee sur un automate d’hematologie (AH). Certaines productions n’ont pu etre liberees car la quantite de CSM en fin de culture etait insuffisante. Les controles de la MO integrent une numeration des cellules souches hematopoietiques par cytometrie en flux apres marquage CD45 et CD34 ainsi qu’une formule manuelle sur frottis. Les premiers Resultats suggerent l’existence d’une correlation entre la concentration de cellules CD34 + dans la MO et la quantite de CSM obtenue en fin de production. Nous avons constate une meilleure amplification des CSM sur les prelevements de MO riches en cellules CD34 + tandis que les lots non-conformes etaient plus souvent issus de MO pauvres en CD34 + et/ou hemodiluees. On observe egalement une difference entre le nombre de leucocytes numeres par l’AH et le nombre de cellules CD45 +, explicable par la presence d’erythroblastes CD45 − et comptes parmi les leucocytes car nucleees. Le pourcentage d’erythroblastes est un indicateur de la qualite de la MO, un pourcentage inferieur a 10 % suggerant une hemodilution du prelevement. Les essais se poursuivent afin de confirmer, sur plus de donnees, l’interet du CD34 comme indicateur predictif de la production de CSM et de definir eventuellement une valeur seuil permettant de decider ou non du lancement d’une production de CSM.